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5分钟前 湖北原位杂交公司价格合理「多图」[贝科新肽a5f8c59]内容:原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得组织细胞中的特异性核酸得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在核酸的原有位置上显示出来。经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检DNA片段或mRNA进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检核酸的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mRNA在胞质中的表达。预杂交
1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。
2)用等体积的HYB+取代HYB-。
3)60℃水浴,预杂交4小时以上。
杂交
1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..
2)60℃ 温浴过夜。
注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
原位杂交技术可以应用于以下场景:
组织中病毒DNA/RNA的检测和定位。例如,可以用于检测EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA等。
癌基因、抑癌基因及其他各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。
检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。
在植物基因组研究中的应用。例如,通过与特定基因序列的探针进行杂交,可以在植物染色体上定位到目标基因的位置,进而构建遗传图谱,为植物育种和基因组研究提供基础数据。
原位杂交技术在其他生物领域也有广泛的应用,例如:
植物学研究:在植物学研究中,原位杂交技术可以用于检测和定位特定基因的表达,研究基因组结构和进化。此外,还可以应用于植物染色体组型分析、基因组印记研究等方面。
微生物学研究:在微生物学领域,原位杂交技术可以用于研究细菌、病毒等微生物的基因表达和定位,以及它们在环境中的分布和相互作用。例如,通过标记特异性探针,可以检测肠道微生物群落中的特定,研究其在人体健康和疾病发生中的作用。